随着分子生物学技术的发展,以DNA和RNA作为诊断材料的分子诊断技术在临床诊断中的应用越来越多。而PCR技术是分子诊断领域最成熟,应用也最广泛的技术,具有灵敏度高、特异性好、及时方便等优点。尤其是在感染性病原体的检测中,PCR已经成为临床诊断的“金标准”。
PCR技术于1985年出现,经过几十年发展经历了从第一代定性PCR到第二代荧光定量PCR,再到第三代数字PCR的三个发展时代。目前主流应用是第二代荧光定量PCR,正处于成长期过渡至成熟期阶段,市场增速在20%左右。在疫情爆发后,作为病原体检测的有效方式,PCR有了更大的需求,行业发展更为快速。
从技术层面上,国内PCR技术已基本达到国际先进水平,荧光定量PCR仪器也早已实现国产化,生产PCR仪器的国产企业也有很多。但是目前并没有统一的实时荧光定量PCR仪性能评价标准,影响了PCR仪行业的进一步发展。为规范PCR仪性能评价方法,保障产品质量,国家标准《实时荧光定量PCR仪性能评价通则》开始编制。
标准由中国检验检疫科学研究院、北京市科学技术研究院分析测试研究所(北京市理化分析测试中心)、深圳华大智造科技股份有限公司、安徽皖仪科技股份有限公司、安图实验仪器(郑州)有限公司等共同起草。征求意见稿已经完成,目前正在征求意见。截止日期为2021年11月2日。
征求意见稿主要内容为实时荧光定量PCR仪的性能评价,涉及对仪器的评价要求及检测方法。其中,评价要求包括评价仪器的正常工作条件、外观、环境适应性和电磁兼容性及性能;性能要求中包括仪器的温度控制、荧光检测、整机性能等。
温度控制性能主要涉及平均升温速率、平均降温速率、温度波动度、温度示值误差、温度均匀度、温度持续时间准确度6个参数。通过计量标准专用温度据采集仪记录仪器在循环程序下样本检测孔的实时温度来评价温度控制性能。荧光检测是实时荧光定量PCR仪中关键功能,包括荧光强度的重复性、均匀度、和线性等3个主要参数。整机性能包括不同通道荧光干扰、仪器线性、定量重复性、定量示值误差等。
原标题:实时荧光定量PCR仪性能评价国家标准征求意见